ELISA隱秘要點之保溫:
在ELISA試劑盒中一般有二次抗原抗體反響,即加標本后和加結合物后,此刻反響的溫度和時刻應按規(guī)則的要求,保溫容器是水浴箱,可使溫度敏捷平衡。各ELISA板不應疊在一起。為防止蒸發(fā),板上應加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的濕盒中。濕盒應該是金屬的,傳熱簡單。
常有ELISA操作者抱怨試驗復雜,而經(jīng)驗豐富的老師們會覺得很簡便,一是熟能生巧,二是把握了其間的隱秘。今日上海通蔚生物帶您來看哪些個高品質(zhì)ELISA試劑盒的操作隱秘吧:
ELISA隱秘要點之加樣:
在ELISA試劑盒中除了包被外,一般需進行45加樣。在定性測定中有時不強調(diào)加樣量的性,此刻應該運用相同口徑的滴管,保持的加樣姿勢,使每滴液體的體積根本相同。在定量測定中則加樣量應力求。標本和結合物的稀釋液應按規(guī)則配制。加樣時應將液體加在孔底,防止加在孔壁上部,并留意不可出現(xiàn)氣泡。
ELISA隱秘要點之洗刷:
洗刷在ELISA試劑盒過程中不是反響聚,但卻是決議試驗勝敗的關鍵。洗刷的目的是洗去反響液中沒有與固相抗原或抗體結合的物質(zhì)以及在反響過程中非特異性吸附于固相載體的攪擾物質(zhì)。洗刷如不*,特別在zui后一次,如有酶結合物的非特異性吸附,將使空白值升高。別的,在間接法中如血清標本內(nèi)的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈,也將與酶標抗體效果而產(chǎn)生攪擾。
ELISA板的洗刷一般可采用以下方法:
1.吸干孔內(nèi)反響液;
2.將洗刷液注滿板孔;
3.放置2min,略作搖擺;
4.吸干孔內(nèi)液,也可傾去液體后在吸水紙上拍干。洗刷的次數(shù)一般為3~4次,有時乃至需洗5~6次。
ELISA試驗操作示意圖:
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