很多人在做檢測的時分,都不太在意ELISA試劑盒中的說明書上的檢測過程,覺得自己都知道,都懂的。但就是由于這種心態(tài),所以形成有時分的檢測結果出現失誤。生物檢測原本就是個很嚴格并且嚴謹的事情,你的一個小的疏忽或許就會形成意想不到的錯誤。
正確的運用ELISA試劑盒的過程:
1.在運用之前要將試劑充沛的混合均勻,可是要注意在搖晃的時分不要產生過多的泡沫,從而形成有太多的空氣進入試劑中,產生測試差錯。
2.根據要檢測樣品的數量來確定的板條數。每個比對的樣品和空白孔是做復孔,而樣品的數量就可以自己視情況而定,不過能用復孔的仍是用復孔。將標本液體1:1稀釋后倒入50微升的反應孔中。
3.在反應孔中在參加50微升的待測樣品,然后馬上參加50微升的生物素標記抗體,蓋上模板,輕輕搖晃使其混合均勻后,ELISA試劑盒在37攝氏度的恒溫下等候1小時。
4.將孔內液體甩去,加滿洗刷液,震動約30秒后,在甩去洗刷的液體,用紙將水吸干。這姿態(tài)重復三次。再在沒空參加80微升的親和鏈酶素-HRP,同上混合均勻后,在37攝氏度的恒溫環(huán)境下等候半小時。
5.同過程四的洗刷辦法。洗刷潔凈后,在沒空中參加底物A,B各50微升,小心混合均勻,避免光照在37攝氏度下等候10分鐘。
6.取出酶標板,敏捷參加停止液50微升,測定結果。在450納米的波長處檢測各個孔的OD值。
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