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牛核因子kB(NF-kB)elisa試劑盒

更新時間:2021-10-15

簡要描述:

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育溫度的考究:

溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫有4℃(冰箱溫度)等,37℃是試驗室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的適宜溫度。

<strong><strong>牛核因子kB(NF-kB)elisa試劑盒</strong></strong>

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試劑盒抗體封suo就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑,從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。但有時因為試驗的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包被。


實驗時常見問題及分析:牛核因子kB(NF-kB)elisa試劑盒

常見問題:讀數(shù)數(shù)值低

可能原因:酶標(biāo)儀設(shè)置不正確

方案對策:

① 在酶標(biāo)儀上檢查波長及濾光片設(shè)置

② 提前打開酶標(biāo)儀預(yù)熱

常見問題:靈敏度低

可能原因:

① ELISA試劑盒

② 保存讀數(shù)前未終止

方案對策:

① 按照說明書要求保存相關(guān)試劑

 OD讀數(shù)前應(yīng)在每孔中加入終止液


上海通蔚生物一直都是注重人才素質(zhì)和專業(yè)技術(shù)的服務(wù)性企業(yè),秉著以人為本,以高滿意度為目標(biāo)的經(jīng)營管理理念,為客戶提供的服務(wù)。我司產(chǎn)品只要遵從它應(yīng)有的規(guī)矩才干和好的完結(jié)試驗,就能得到更精準(zhǔn)的實驗結(jié)果!并且售后服務(wù)有專門的技術(shù)員可以直接對接終端客戶,實行包退包換政策!


封閉液、洗滌液及保護(hù)液的優(yōu)化:

封閉液的優(yōu)化:

采用文獻(xiàn)報道的方法進(jìn)行封閉。其封閉液的組成為:10mM磷酸鹽緩沖液含1%的牛血清白蛋白(BSA);


洗滌液的配制:

采用文獻(xiàn)報道的方法配制洗滌液


酶標(biāo)板保護(hù)液的優(yōu)化: 牛核因子kB(NF-kB)elisa試劑盒

酶標(biāo)板經(jīng)過封閉后在低溫下僅能存放2周左右,為了延長固相酶標(biāo)板上抗原的穩(wěn)定性,我們增加了一步保護(hù)酶標(biāo)板的程序;在10mM的磷酸鹽中加入適量的糖、無關(guān)蛋白質(zhì)、慶大霉素以及二價金屬離子,作為酶標(biāo)板保護(hù)劑,在封閉完后加入保護(hù)液于4℃冰箱中孵育放置一個晚上。


同時與未做保護(hù)的酶標(biāo)板進(jìn)行對照,然后將保護(hù)的及未保護(hù)的酶標(biāo)板置于37烘箱中放置15天,考察保護(hù)液對酶標(biāo)板的穩(wěn)定性的影響。


試劑盒包被原的性質(zhì)很重要,蛋白濃度,是否降解,這關(guān)系到你做出的試劑盒抗體可不可以被其識別,所以保留抗原很重要,做重組蛋白時,技術(shù)員都嚴(yán)格警告一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。


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